构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2010, Vol. 28 ›› Issue (3): 18-封三.

构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库

方强¹，夏惠¹，袁远英¹，曹俊²，王雪梅¹，齐文娟¹，高琪^{2 *}

1 蚌埠医学院病原生物学教研室，安徽省感染与免疫重点实验室，蚌埠 233030；2江苏省寄生虫病防治研究所，卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室，无锡 214064

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-06-30 发布日期:2010-06-30

Construction of Full-length cDNA Library ofErythrocytic Stage Plasmodium vivax

FANG Qiang¹，XIA Hui1，YUAN Yuan-ying¹，CAO Jun²，
WANG Xue-mei¹，QI Wen-juan¹，GAO Qi^{2 *}

1 Department of Microbiology and Parasitology，Bengbu Medical College；Anhui Key Laboratory of Infection and Immunity，Bengbu 233030，China；2 Jiangsu Institute of Parasitic Diseases；Key Laboratory on Technology for Parasitic Disease Prevention and Control，Ministry of Health，China，Wuxi 214064，China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-06-30 Published:2010-06-30

摘要/Abstract

摘要： 【提要】采集未经治疗的间日疟患者血样，滤去白细胞后浓集含虫红细胞，提取总RNA，用SMART cDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容，蓝白斑筛选，计算重组率。随机挑选48个菌落，用M13+／－引物进行PCR鉴定插入片段大小。构建的间日疟原虫红内期全长cDNA文库原始库容为1.14×106，重组率为97.2%，重组子插入cDNA片段大小为900～2 500 bp。

关键词: 间日疟原虫, 红内期, cDNA文库

Abstract: 【Abstract】 Blood samples were collected from vivax malaria patients without antimalarial drug therapy. After filtration through Plasmodipur filter to remove white blood cells, Plasmodium vivax-infected RBCs were enriched by Percoll. Total RNA of P. vivax in red blood cells was isolated. A full-length cDNA library of erythrocytic stage P. vivax was constructed by the SMART cDNA library construction kit. The volume and recombinant rate of the library were evaluated. The inserted fragments were identified by PCR amplification. The titer of cDNA library was 1.14×106. The length of inserted fragment ranged from 900 to 2 500 bp, and the recombination efficiency accounted for 97.2%.

Key words: Plasmodium vivax, Erythrocytic stage, cDNA library

方强;夏惠;袁远英;曹俊;王雪梅;齐文娟;高琪. 构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(3): 18-封三.

FANGQiang;XIAHui;YUANYuan-ying;CAOJun;WANGXue-mei;QIWen-juan;GAOQi*. Construction of Full-length cDNA Library ofErythrocytic Stage Plasmodium vivax[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2010, 28(3): 18-封三.

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