堆型艾美球虫子孢子单克隆抗体的制备及鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2006, Vol. 24 ›› Issue (6): 12-456.

堆型艾美球虫子孢子单克隆抗体的制备及鉴定

王承民1;何宏轩2;秦建华3;陈桂香1;郭其祯4;杭柏林1

1 河南科技学院细胞工程重点实验室，新乡 453003； 2 中国科学院动物研究所，北京 100080; 3 河北农业大学动物科技学院，保定 071001； 4 河南省新乡市畜牧局，新乡 453003

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-12-30 发布日期:2006-12-30
通讯作者: 王承民

Preparation and Identification of Monoclonal Antibody Against Sporozoites of Eimeria acervulina

WANG Cheng-min1 ;HE Hong-xuan2;QIN Jian-hua3;CHEN Gui-xiang1;
GUO Qi-zhen4;HANG Bo-lin1

1 Cell Engineering Key Laboratory of Henan Institute of Science and Technology，Xinxiang 453003, China; 2 Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China; 3 Animal Science and Technology School of Hebei Agricultural University，Baoding 071001, China; 4 Animal Husbandry Bureau of Xinxiang，Xinxiang 453003, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2006-12-30 Published:2006-12-30
Contact: WANG Cheng-min

摘要/Abstract

摘要： 目的建立堆型艾美球虫（Eimeria acervulina）子孢子表面抗原的杂交瘤细胞株。方法使用纯化的堆型艾美球虫子孢子直接免疫BALB/c小鼠，采用杂交瘤技术建立细胞株，制备单克隆抗体。用ELISA确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、免疫球蛋白的类型和亚类，并对单克隆抗体进行鉴定。结果获得4株可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中Easp-3G3、Easp-5G10为IgG1 类，Easp-3H6为IgG2b 类，Easp-5H4为IgG2a 类。4株单克隆抗体均能与堆型艾美球虫子孢子的抗原蛋白反应，但仅Easp-5H4能与柔嫩艾美球虫子孢子抗原蛋白反应。Easp-3G3和Easp-5G10与另外2种单克隆抗体的识别位点不同，而Easp-3G3与Easp-5G10、Easp-3H6与Easp-5H4的识别位点相近。结论制备了4株堆型艾美球虫子孢子单克隆抗体。

关键词: 堆型艾美球虫, 子孢子, 单克隆抗体, 鉴定

Abstract: Objective To establish hybridoma cell lines against sporozoites of Eimeria acervulina. Methods BALB/c mice were immunized with purified sporozoites of E. acervulina. Hybridoma cell lines were set up by using hybridoma technique， and monoclonal antibodies were prepared. The monoclonal antibody was identified by determining their cross reactivity， relative affinity， immunoglobulin class or subclass with enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Results Four hybridoma cell lines stably secreting McAbs against sporozoites were obtained: Easp-3G3 and Easp-5G10 belonging to IgG1， Easp-3H6 belonging to IgG2b， Easp-5H4 belonging to IgG2a. All four McAbs bound with E. acervulina sporozoite protein， but the Easp-5H4 McAb showed cross reactivity with E. tenellum sporozoite protein. Different antigenic epitopes were recognized by Easp-3G3 or Easp-5G10 and Easp-3H6 or Easp-5H4. Conclusion Three of the four produced monoclonal antibodies show high specificity and affinity to the Eimeria acervilina sporozoites.

Key words: Eimeria acervulina, Sporozoite, Monoclonal antibody, Identification

王承民;何宏轩;秦建华;陈桂香;郭其祯;杭柏林. 堆型艾美球虫子孢子单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2006, 24(6): 12-456.

WANGCheng-min;HEHong-xuan;QINJian-hua;CHENGui-xiang;GUOQi-zhen;HANGBo-lin. Preparation and Identification of Monoclonal Antibody Against Sporozoites of Eimeria acervulina[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2006, 24(6): 12-456.

[1]	陈齐鲁, 王旭, 李春阳, 官亚宜. 线粒体基因在带绦虫科分子分类鉴定及系统进化研究中的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 767-773.
[2]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[3]	乔飞, 刘鏊, 余复昌, 齐萌. 1例牛带绦虫感染的诊断和鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 285-287.
[4]	刘路瑶, 杨聪山, 章翔, 程蓉蓉, 洪宇航, 吴成龙, 孙萌, 陈木新, 艾琳, 徐前明. 孔雀源异刺线虫的形态学特征及分子鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 816-820.
[5]	秦馨, 朱锋, 张坤, 张健. 约氏疟原虫血淋巴子孢子诱导斯氏按蚊免疫基因分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 449-454.
[6]	罗飞, 谭妍, 周爽, 袁熠, 李珊珊, 徐静茹, 周杨. 重庆市基层医疗卫生机构疟原虫镜检能力评估与分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 93-99.
[7]	郭楚桐, 欧阳春艳, 何俊贤, 季树宇, 杨礼腾, 刘晓宇. 屋尘螨第十类变应原的克隆、表达、纯化及免疫原性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 723-729.
[8]	莫筱瑾, 吴群峰, 冯正, 徐斌, 张颋, 陈绅波, 胡薇. SCAR-PCR技术鉴定日本血吸虫尾蚴性别的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 777-780.
[9]	刘建秀, 汪俊云. 分子技术在利什曼原虫分类与鉴定上的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 508-513.
[10]	金行一, 张玲玲, 朱素娟, 徐卫民, 陈珺芳, 阮卫, 姚立农, 陈华良. 间日疟原虫裂殖子表面蛋白1和环子孢子蛋白基因多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(3): 323-331.
[11]	徐艳春, 董莹, 邓艳, 毛祥华, 陈梦妮, 张苍林, 江陆斌. 云南省不同感染来源间日疟原虫环子孢子蛋白基因多态和种群结构分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(1): 67-73.
[12]	蔡茂荣, 罗鋆, 艾琳, 廖奇, 卓鸣莺, 陈佳, 陈锦钟, 柳建发, 程由注. 福建北部地区斯氏并殖吸虫疫源地宿主感染情况分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(1): 102-109.
[13]	杨锐, 郑宇婷, 杨晓羽, 董利民, 林祖锐, 周耀武, 曾旭灿, 李鸿斌, 姜进勇. 云南省边境地区景洪市疟疾媒介调查[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(4): 406-410.
[14]	林陈鑫, 黄姝玲, 林诗涵, 江典伟, 谢汉国. 福建省沿海鱼类异尖线虫幼虫感染情况调查及虫种鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(4): 417-421.
[15]	黄雨婷, 黄天谊, 卢丽丹, 佘丹娅, 李世军. 基于线粒体细胞色素氧化酶亚单位3基因鉴定贵州省首例输入性卵形疟病例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 368-371.