恶性疟原虫FCC1/HN株新抗原表达序列标记位(ESTs)的获得

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1999, Vol. 17 ›› Issue (6): 12-366.

恶性疟原虫FCC1/HN株新抗原表达序列标记位(ESTs)的获得

阎宗合¹;谢毅²;李明¹;王萍¹;王燕妮¹;毕惠祥¹;李英杰¹

第一军医大学热带医学研究所热带病研究室,广州 510515;复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海 200433

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1999-12-30 发布日期:1999-12-30

FINDING OF NEW FCC1/HN ANTIGENIC EXPRESSED SEQUENCE TAG(ESTs) OF PLASMODIUM FALCIPARUM

YAN Zhonghe¹;XIE Yi²;LI Ming¹;WANG Ping¹;WANG Yanni¹;BI Huixiang¹;LI Yingjie¹

1 Department of Tropical Diseases;Institute of Tropical Medicine;The First Military Medical University;Guangzhou;510515 2 State Key Laboratory of Genetic Engineering,Fudan University,Shanghai,200433

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1999-12-30 Published:1999-12-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的：以筛选恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ株λｇｔ１１ｃＤＮＡ表达文库所获得的强阳性克隆作基础，对上述强阳性克隆的ｃＤＮＡ插入片段进行ＤＮＡ序列测定，阐明相对应的新表达序列标签（ＥＳＴｓ），作为发现新抗原基因的线索。方法：以ｃＤＮＡ表达文库接头的较长链作ＰＣＲ引物、扩增ｃＤＮＡ插入片段，将扩增产物克隆入Ｍ１３ｍｐ１８测序载体，进行部分ＤＮＡ序列测定、编辑，将之在ＧｅｎＢａｎｋ中进行ＤＮＡ序列同源性搜索比较和分析。结果：获得１个Ｃ０３序列为已知恶性疟原虫热休克蛋白７０－２基因片段，发现５个新的具有抗原意义的恶性疟原虫表达序列标记位（ＥＳＴｓ）。结论：这５个新的恶性疟原虫表达序列标记位为发现新的恶性疟原虫抗原基因奠定了基础。

关键词: 恶性疟原虫, 抗原, cDNA, 表达序列标记位

Abstract: 　AIM: To sequence the strong positive clones obtained by immuno-screening of Plasmodium falciparum FCC1/HN λgt11 cDNA expression library, and to elucidate the antigenic expressed sequence tags through sequencing the cDNA insert of these positive clones, and new antigenic ESTs could serve as a resource to pursue their corresponding antigen genes. METHODS: cDNA inserts of positive λgt11 phage clones were amplified by PCR. The PCR products, after purification, were cloned into the M13 mp18 sequencing vector. Single-stranded M13 DNA was prepared and sequenced. Then the acquired sequences were compared in homologies with EMBL/GenBank database on the PC/GENE software system and searched in NCBI (National Center for Biotechnology Information) GenBank using BLAST (Basic Local Alignment Search Tool) commond. RESULTS: Sequence C03 was part of the known P.falciparum antigenic heat shock protein 70 (Pfhsp70) gene, while the other 5 sequences were new P.falciparum antigenic expressed sequence tags (ESTs). CONCLUSION: The 5 new antigenic ESTs generated could serve as the breaking through points in our efforts to find out new P.falciparum antigen genes.

Key words: Plasmodium falciparum, antigen, cDNA, expressed sequence tags

阎宗合;谢毅;李明;王萍;王燕妮;毕惠祥;李英杰. 恶性疟原虫FCC1/HN株新抗原表达序列标记位(ESTs)的获得[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1999, 17(6): 12-366.

YANZhonghe;XIEYi;LIMing;WANGPing;WANGYanni;BIHuixiang;LIYingjie. FINDING OF NEW FCC1/HN ANTIGENIC EXPRESSED SEQUENCE TAG(ESTs) OF PLASMODIUM FALCIPARUM[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1999, 17(6): 12-366.

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